鈣熒光探針Fluo-4, AM
| 產(chǎn)品編號： | 3985693 |
| 產(chǎn)品類別： | 熒光探針 |
| 應用： | 鈣熒光探針 |
| 純度規(guī)格： | ≥95%，5mM 無水DMSO溶液 |
| 包裝規(guī)格： | 100μg，1mg，10×100μg，20μL |
| 優(yōu)惠價： | 立即咨詢 |
| 產(chǎn)品編號 | 純度規(guī)格 | 包裝單位 | 單價(元) | 交貨期 | 詢價單 |
| 3985693 | ≥95% | 100μg | 詢價 | 2-5天 | |
| 3985693 | ≥95% | 1mg | 詢價 | 2-5天 | |
| 3985693 | ≥95% | 10×100μg | 詢價 | 2-5天 | |
| 3985693 | 5mM 無水DMSO溶液 | 20μL | 詢價 | 2-5天 |
273221-67-3
鈣熒光探針Fluo-4, AM
Fluo-4, AM
1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
| 分子式 | C51H50F2N2O23 |
| 分子量 | 1096.94 |
| Ex(nm) | 494 |
| Em(nm) | 516 |
| 儲存條件 | -20℃干燥避光保存 |
| 運輸條件 | 常溫 |
| 保質(zhì)期 | 12個月 |
Fluo-4是一種將Fluo-3結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強的F，它的最大激發(fā)波長會向短波長處偏離10 nm左右。這個波長更接近于氬激光器的波長，所以用氬激光器激發(fā)時，F(xiàn)luo-4的熒光強度比Fluo-3強一倍。
Fluo-4, AM穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細胞內(nèi)，F(xiàn)luo-4若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光，最大激發(fā)波長為494nm，最大發(fā)射波長為516nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
操作說明（for Human T cells）*
（1） 試劑
2 mM的Fluo-4, AM/DMSO（將1mg Fluo-4, AM溶于442μL DMSO）
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution（HBSS）
HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）
（2） 操作
①. 向Fluo-4, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以 防止Fluo-4, AM在HBSS中聚合并能幫助其進入細胞。
②. 用HBSS稀釋Fluo-4, AM溶液，制備4μM的Fluo-4, AM工作液。
③. 將Fluo-4, AM工作液加入細胞，在37℃培養(yǎng)20分鐘。
④. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。
⑤. 用HEPES buffer saline洗滌細胞3次，然后用HEPES buffer saline使細胞重懸浮，制成1×105 cells/mL的溶液。
⑥. 37℃下培養(yǎng)10分鐘，然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長494nm，發(fā)射波長516nm。
*標記的條件因細胞種類而異，在每次實驗前，請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。
儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
